Бешенство у людей и животных. Антигены вируса бешенства. Патогенез бешенства. Клиника бешенства. Признаки бешенства Фиксированный вирус

Бешенство - острое инфекционное заболевание человека и теплокровных животных, вызываемое нейротропным вирусом и характеризующееся приступами резкого возбуждения с последующим развитием параличей.

Этиология . Известны два самостоятельных вида вируса бешенства: уличный («дикий») и фиксированный, полученный Пастером при адаптации уличного вируса к организму кролика в измененных условиях заражения. Фиксированный вирус частично или полностью потерял способность выделяться через слюнные железы зараженных животных и проникать в ЦНС при подкожном введении: при введении животным в мозг вызывает заболевание после инкубационного периода в 4 - 7 дней (уличный - 12-25 дней); его титр в мозге всегда выше, чем уличного. Фиксированный вирус вызывает, как правило, атипичную форму бешенства (паралитическую). Вакцинные штаммы фиксированного вируса (штаммы Пастера, Бабеша, Хедьеша, Флюри) создают полноценный иммунитет ко всем известным до сих пор штаммам уличного вируса бешенства.

Кипячение убивает вирус бешенства в течение 2 мин. Растворы лизола или хлорамина (2-3%), 0,1% раствор сулемы быстро и надежно обеззараживают загрязненные вирусом материалы. Вирус хорошо сохраняется при низкой температуре и после вакуумного высушивания из замороженного состояния.

До 50-х годов 20 века вирус бешенства выращивали только в организме восприимчивых животных. Мозг заболевших животных использовали в качестве источника получения вируса для практических целей и лабораторных исследований. Практически оказалось трудным освобождение вируса от балластной мозговой ткани. Поэтому большое значение приобретает выращивание вируса бешенства в организме эмбрионов птиц и особенно в культуре растущих клеток; в последнем случае получили свободную от балластных веществ чистую культуру. Из штаммов вируса, адаптированных к организму развивающегося куриного эмбриона, за рубежом для изготовления ветеринарных вакцин наиболее часто используют штамм Флюри, выделенный от человека путем внутримозгового заражения однодневного цыпленка. Способность фиксированного вируса штаммов Пастера и Флюри размножаться в организме развивающегося утиного или куриного зародыша позволила получить яичную вакцину для лечебно-профилактической иммунизации человека (США, Япония). Однако яичная вакцина также содержит балластные ткани, которые могут быть причиной некоторых осложнений.

Некоторые штаммы фиксированного вируса хорошо размножаются в первичной трипсинизированной культуре клеток почки сирийского хомяка, эмбриона овцы, куриного эмбриона (штамм Флюри), почки зеленой мартышки и в культуре диплоидных клеток легких эмбриона человека. На этой основе в СССР и США получена экспериментальная культуральная антирабическая вакцина, иммуногенная в опытах на животных (см. Антирабические вакцины).

Вирус бешенства имеет форму короткой палочки с закругленными концами или с одним плоским концом, длина его в среднем 160 ммк и ширина 60 м.чк. Обнаружены также нитевидные образования длиной 300 ммк и более.

Бабеш (У. Babes) в 1887 г. и Негри (A. Negri) в 1903 г. описали при бешенстве специфические цитоплазматические включения в невронах головного и спинного мозга; позже они были обнаружены в ганглиях паренхиматозных органов (надпочечники, слюнные железы), в эпителиальных клетках роговицы глаза. Обнаружение этих включений, названных тельцами Бабеша - Негри, имеет абсолютное диагностическое значение. Природа их полностью не выяснена. С помощью метода флюоресцирующих антител доказано, что тельца Бабеша - Негри содержат специфический антиген вируса бешенства, однако при электронной микроскопии элементарные тельца вируса в них не обнаружены. Тельца Бабеша - Негри представляют собой либо коагулированную нежизнедеятельную массу элементарных телец вируса, либо компоненты пораженной клетки, антигенно измененные под действием вируса (результат защитной реакции клеток).

Эпидемиология бешенства - типичный зооноз, распространяемый животными, главным образом плотоядными; от человека к человеку инфекция не передается.

Основным резервуаром вируса бешенства являются собаки, кошки, дикие плотоядные животные, главным образом лисы, а в странах Америки - летучие мыши. Передача инфекции от животного к животному и от животного к человеку происходит при укусе через свежие раны наружных покровов, а в отдельных случаях и при ослюнении поврежденной кожи или слизистой оболочки.

Патологическая анатомия и патогенез . Поражается преимущественно нервная система, в том числе нервные ганглии некоторых железистых органов, особенно слюнных желез, в них находят вирус бешенства; иногда его обнаруживают в спинномозговой жидкости.

В головном и спинном мозге, слюнных железах, надпочечниках - отечность, полнокровие, участки кровоизлияний. Гистологически - негнойный энцефалит очагового характера, гиперемия сосудов, набухание эндотелия, инфильтрация лейкоцитов в просвет сосудов и вокруг них, пролиферация глии и образование гранулем (узелки бешенства), дегенеративные и некротические изменения нервных клеток.

Вирус на раневой поверхности соприкасается с поврежденными нервными окончаниями и по периферическим нервным волокнам проникает в спинной и головной мозг, размножается там, а затем продвигается центробежно. Лимфогематогенное продвижение вируса не доказано. Вирус выделяется через слюнные железы не только в течение всей болезни, но и за 24-72 часа до проявления клинических признаков заболевания, в исключительных случаях - за 8 дней. Поэтому животное, покусавшее человека, проходит 10-дневный карантин; если в течение этого срока оно останется здоровым, возможность инфицирования человека исключается; пострадавшему не производят прививки.

Описанные патогенетические особенности свойственны заболеванию вызываемому «собачьим» вирусом бешенства.

При бешенстве, вызываемом вирусом летучих мышей, вирус размножается в мышечной ткани, сохраняется в межлопаточном буром жировом слое; отмечаются вирусемия, интраплацентарная передача вируса от матери к плоду; течение заболевания может быть бессимптомным, вирус в течение длительного времени выделяется через слюнные железы, возможен респираторный механизм передачи инфекции.

Иммунитет . Естественный иммунитет к бешенству существует у холоднокровных животных. Редко наблюдающаяся невосприимчивость человека и теплокровных животных свидетельствует о наличии естественного иммунитета и у теплокровных, более выраженного у птиц, чем у млекопитающих. Естественно приобретенный иммунитет не известен, так как случаи выздоровления от бешенства достоверно не доказаны.

Иммунология бешенства связана главным образом с изучением прививочного иммунитета, в природе которого несомненная роль принадлежит вируснейтрализующим антителам; это подтверждается высоким содержанием в крови антител, что соответствует состоянию резистентности; пассивная иммунизация антирабическим гамма-глобулином является эффективным методом лечебно-профилактической иммунизации. Однако нельзя прививочный иммунитет связывать только с наличием антител. Так, после экстраневральной активной или пассивной иммунизации животные становятся резистентными даже к непосредственному введению вируса бешенства в мозг. При этом в мозге вируснейтрализующие антитела либо не определяются совсем, либо определяются в очень низком титре. После интрацеребральной иммунизации штаммом Флюри у мышей развивается напряженный иммунитет к интрацеребральному заражению, а антитела в мозге не обнаруживаются.

МУ 3.3.1.1099-02

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

3.3.1. ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКА

Безопасность работы с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства

Дата введения 2002-04-01

1. РАЗРАБОТАНЫ Российским научно-исследовательским институтом "Микроб" Министерства здравоохранения Pocсийской Федерации (д.м.н. И.А.Дятловым, к.м.н. А.К.Никифоровым, к.м.н. С.А.Ереминым); Государственным НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича Министерства здравоохранения Российской Федерации (д.м.н. А.А.Мовсесянцем, к.м.н. И.А.Озерецковским, н.с. Г.Б.Агеенко).

3. УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации - Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 15 января 2002 года. Введены в действие 1 апреля 2002 года.

4. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

1. Область применения

1. Область применения

1.1. Настоящие методические указания разработаны в соответствии с Федеральным законом "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ , "Положением о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании" и санитарными правилами "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами. СП 1.2.731-99" .

1.2. Требования настоящих методических указаний обязательны для органов и учреждений здравоохранения субъектов Российской Федерации.

2. Нормативные ссылки

В настоящих методических указаниях использованы ссылки на следующие нормативные документы:

2.1. Федеральный закон "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" N 52-ФЗ от 30 марта 1999 г .

2.2. Санитарные правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами. СП 1.2.731-99" .

2.3. Санитарные правила "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. СП 1.2.036-95" .

2.5. Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев), утв. Минздравом СССР от 6 апреля 1973 N 1045-73.

2.6. Строительные нормы и правила "Общественные здания и сооружения". СНиП 2.08.02-89 и "Пособие по проектированию учреждений здравоохранения" в 5 томах. - Т.1, 3, 5. Госгражданстрой. - М., 1989.

2.7. ОСТ-42-21-2-85 "Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения. Методы, средства. Режимы".

2.8. Приказ "Об утверждении временных перечней вредных, опасных веществ и производственных факторов, а также работ, при выполнении которых проводятся предварительные и периодические медицинские осмотры", утв. Минздравмедпромом и Госкомсанэпиднадзором России от 05.10.95 N 280/88 .

2.9. "Инструкция по эксплуатации и контролю эффективности вентиляционных устройств на объектах здравоохранения", утв. Минздравом СССР от 20 марта 1975 г.

2.11. "Методические указания по применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях", утв. Минздравмедпромом России oт 28.02.95 N 11-16/03-06 .

2.12. "Методические указания по контролю работы паровых и воздушных стерилизаторов" , утв. Минздравом СССР от 28 февраля 1991 г. N 15/6-5 .

2.13. "Правила техники безопасности, производственной санитарии и санитарно-противоэпидемического режима для предприятий по производству бактерийных и вирусных препаратов", утв. Минздравом СССР от 30 августа 1979 г.

2.14. Методы лабораторных исследований по бешенству. ВОЗ. - Женева,1975.

3. Термины, определения и сокращения

Авария - нештатная ситуация, при которой создается реальная или потенциальная возможность выделения патогенного агента в воздух производственной зоны, окружающую среду или заражение персонала.

Биологическая безопасность - система медико-биологических, организационных и инженерно-технических мероприятий и средств, направленных на защиту работающего персонала, населения и окружающей среды от воздействия патогенных биологических агентов.

Бокс биологической безопасности - конструкция, используемая для физической изоляции (удержания и контролируемого удаления из рабочей зоны) микроорганизмов с целью предотвращения возможности заражения персонала и контаминации воздуха рабочей зоны и окружающей среды.

Боксированное помещение (бокс) - изолированное помещение с тамбуром (предбоксником).

Лаборатория - структурное подразделение, выполняющее экспериментальные и /или/ производственные работы с патогенными биологическими агентами.

"Заразная" зона - помещение или группа помещений лаборатории, где осуществляются манипуляции с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства.

"Чистая" зона - помещение или группа помещений лаборатории, где не проводятся манипуляции с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства.

Производственная работа - работа по производству медицинских иммунобиологических препаратов с использованием производственных штаммов фиксированного вируса бешенства.

Фиксированный вирус бешенства* - аттенуированный штамм вируса бешенства, полученный путем длительного пассирования через головной мозг кролика. Производственные штаммы фиксированного вируса бешенства хранятся в ГИСК им. Л.А.Тарасевича и выдаются один раз в год учреждениям, имеющим право на работу с микроорганизмами III-IV группы патогенности.
_______________
* Например, штаммы фиксированного вируса бешенства "Москва" и "CVS".


СИЗ - средства индивидуальной защиты.

4. Требования к организации работы с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства

4.1. Общие требования

Работа с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства может проводиться в лабораториях, имеющих разрешение, выданное в установленном порядке Главным государственным санитарным врачом субъекта Российской Федерации сроком на 5 лет. Оно утрачивает силу при передислокации или перепланировке лаборатории, а также может быть аннулировано при нарушениях требований биологической безопасности.

4.2. Требования к производственным штаммам фиксированного вируса бешенства

Комитет экспертов ВОЗ (1972) рекомендовал следующие требования к производственным штаммам фиксированного вируса бешенства:

- тщательная регистрация истории пассажей;

- проведение в производстве не более 10 пассажей с момента последнего контроля его биологических свойств;

- минимальная патогенная активность для лабораторных животных при экстраневральном введении;

- антигенная специфичность и иммуногенная активность;

- изучение свойств производственного штамма фиксированного вируса бешенства после каждых 10 пассажей.

Фиксированный вирус бешенства должен иметь следующие основные признаки:

- короткий инкубационный период (4-5 дней);

- большую патогенность для кроликов при интрацеребральном заражении;

- значительное ослабление способности образовывать тельца Негри;

- вызывать паралитическую форму бешенства без явлений возбуждения;

- накопление в ЦНС мышей до 6,0-7,0 IgLD/0,03 мл;

- высокую тропность к ЦНС и низкую тропность к внутренним органам.

4.3. Требования к помещениям и оборудованию лаборатории

4.3.1. Лаборатории, работающие с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства должны располагаться в отдельно стоящем здании или изолированной части здания с отдельным входом.

4.3.2. Лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, канализацией, электричеством, отоплением и вентиляцией. Все помещения лаборатории должны иметь естественное и искусственное освещение в зависимости от вида работ в соответствии с требованиями действующих нормативных документов.

4.3.3. Помещения лаборатории должны быть разделены на "заразную" и "чистую" зоны. Планировочные решения и размещение оборудования должны обеспечивать поточность продвижения производственных штаммов фиксированного вируса бешенства и выполнение требований настоящей инструкции.

4.3.4. Лаборатория должна иметь набор рабочих комнат и других помещений, включая душевую комнату, в соответствии с производственной мощностью и номенклатурой выполняемых технологических операций.

4.3.5. Внутренняя отделка помещений должна быть выполнена в соответствии с функциональным назначением. Поверхность пола, стен, потолка в лабораторных помещениях "заразной" зоны должна быть гладкой, без щелей, легко обрабатываемой, устойчивой к действию моющих и дезинфицирующих средств, полы не должны быть скользкими.

4.3.6. Окна и двери помещений "заразной" зоны лаборатории должны быть герметичными.

4.3.7. Имеющаяся вытяжная вентиляция из "заразной" зоны лаборатории должна быть изолирована от других вентиляционных систем и оборудована фильтрами тонкой очистки воздуха. При использовании боксов биологической безопасности II класса, снабженных системой вытяжной вентиляции с фильтрами тонкой очистки типа "Лайк", система вытяжной вентиляции может быть использована без установки фильтров.

4.3.8. Разрешается установка кондиционеров в рабочих комнатах и боксах. Во время работы с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства кондиционеры должны быть отключены.

4.3.9. Лабораторная мебель в "заразной" зоне должна иметь покрытие, устойчивое к действию моющих и дезинфицирующих средств. Поверхность столов не должна иметь швов и трещин.

4.3.10. Ширина проходов к рабочим местам или между двумя рядами выступающего оборудования должна быть не менее 1,5 м (с учетом выступающих конструкций).

4.3.11. Помещения, где проводится работа с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства, должны быть оборудованы бактерицидными лампами в соответствии с "Методическими указаниями по применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях". Лампы включают после проведения влажной уборки. Вход в помещение разрешается только после проветривания не менее 30 мин (при применении безозоновых бактерицидных ламп проветривания не требуется). Необходимо вести учет времени работы каждой лампы с отметкой в журнале.

4.3.12. При ориентации окон на юг необходимо предусмотреть защиту рабочих столов от попадания прямого солнечного света путем использования светозащитных пленок, жалюзи из материала, устойчивого к дезинфектантам.

4.3.13. Помещения лабораторий должны быть непроницаемы для грызунов и насекомых.

4.3.14. Лаборатория должна быть обеспечена средствами пожаротушения.

4.4. Требования к проведению работ в лаборатории

4.4.1. Работу с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства выполняют специалисты с высшим и средним специальным образованием, прошедшие специальную подготовку.

4.4.2. Персонал допускается к работе с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства после проведения инструктажа по соблюдению требований биологической безопасности. Последующие инструктажи проводят не реже 1 раза в год, с записями в соответствующих журналах.

4.4.3. Приборы, оборудование и средства измерений, используемые в работе лаборатории, должны быть аттестованы, технически исправны, подвергаться метрологическому контролю в установленные сроки, иметь технический паспорт. На каждый прибор (установку) должны быть разработаны правила (инструкция) по их эксплуатации с учетом требований биологической безопасности.

4.4.4. В лаборатории должны использоваться дезинфицирующие средства, допущенные к применению (3%-ный хлорамин). Срок хранения готового раствора не должен превышать 15 суток.

4.4.5. В помещениях "заразной" зоны лаборатории проводятся:

- работа с животными (заражение, вскрытие);

- содержание инфицированных животных;

- дезинтеграция, гомогенизация мозговых тканей и другие операции с вероятным образованием аэрозоля;

- заражение культуры клеток;

- приготовление взвесей и суспензий;

- работа с лиофилизированными производственными штаммами фиксированного вируса бешенства.

4.4.6. Во время работы двери рабочих комнат должны быть закрыты. Перед работой включается вентиляция "на отток". Выход из рабочей комнаты во время проведения работы запрещается.

4.4.7. Заражение животных осуществляется не менее чем двумя сотрудниками.

4.4.8. При пипетировании необходимо пользоваться резиновыми грушами или автоматическими устройствами.

4.4.9. Перед использованием посуда, пипетки, оборудование, шприцы и т.д. должны быть проверены на целостность и исправность.

4.4.10. Ампулы с лиофилизированными производственными штаммами фиксированного вируса бешенства вскрывают стерильно над подносом или лотком с марлевой салфеткой, пропитанной дезинфицирующим раствором. Верхний конец ампулы нагревают над пламенем горелки, снимают парафин, затем кусочком стерильной ваты, смоченным в стерильной воде, осторожно прикасаются к оттянутому концу ампулы для образования трещины. Той же влажной ватой обводят вокруг носика ампулы. После образования круговой (или не полностью круговой) трещины конец ампулы накрывают марлевой салфеткой или ватой и обламывают пинцетом.

4.4.11. После вскрытия ампулы в нее добавляют 1,0 мл стерильной дистиллированной воды и осторожно встряхивают. Полученную суспензию, содержащую фиксированный вирус бешенства используют для заражения лабораторных животных.

4.4.12. Для внутримозгового заражения кролика его надежно фиксируют на специальном станке или дают легкий наркоз (2-2,5 мл раствора Рометара внутримышечно за 20-30 мин до заражения). Затем аккуратно выстригают шерсть в зоне предполагаемого введения, обрабатывают 70%-ным раствором этанола и 5%-ным раствором йода и с помощью стерильного шприца емкостью 2 мл и иглы размером N 20: (10х0,90) вводят 0,25 мл суспензии фиксированного вируса бешенства штамм. Прокол делают приблизительно на середине линии, условно соединяющей наружный угол глаза и ухо. При заражении крупных кроликов можно пользоваться шилом из нержавеющей стали или троакаром. Явные признаки паралича появляются у кроликов на 4 день после инокуляции; в редких случаях они развиваются до 7 дня. Извлечение мозга производят у животного только после развития полной картины паралича, характерного для фиксированного вируса бешенства. К числу первых симптомов экспериментального бешенства относятся: повышение температуры тела, пугливость и расширение зрачков. Затем появляются менингеальные явления, парезы, начинающиеся обычно с задних конечностей, быстро прогрессирующие параличи, захватывающие все конечности, шейную и затылочную мускулатуру.

4.4.13. Больных кроликов с картиной полного паралича, но с еще сохранившимся дыханием забивают путем тотального обескровливания. Головной мозг используется для изготовления рабического антигена. После декапитации производят снятие шкурки, отделяют позвоночник вместе со спинным мозгом, которые подвергают автоклавированию (2,0 кГс/см(0,2 МПа). 132±2 °С), как заразный материал.

4.4.14. Для извлечения головного мозга животное укладывают на секционный лоток животом вниз так, чтобы голова оказалась на краю стола. С помощью пинцета, скальпеля и ножниц отделяют голову от туловища. Затем скальпируют кожу головы, удаляя уши и верхние веки. Обнаженную поверхность черепа смачивают 70%-ным спиртом и помещают в кристаллизатор. Кристаллизатор переносят в стерильный бокс для приготовления антигена. Перед вскрытием черепа его двухкратно обрабатывают 70%-ным этиловым спиртом. Затем череп кролика закрепляют в специальное приспособление (прилож.1), обеспечивающее надежную фиксацию головы животного. Удерживая секционный нож в левой руке, правой рукой с помощью молотка вскрывают черепную коробку четырьмя прямоугольными разрезами. Сначала следует сделать разрез по линии соединяющей середины глаз, затем разрез в теменной области, а затем соединить эти два разреза перпендикулярными разрубами. Затем, отложив в сторону секционный нож и молоток, с помощью пинцета и ножниц высвобождают твердую мозговую оболочку и переднюю часть мозга отделяют на уровне обонятельной доли; пересекают продолговатый мозг позади мозжечка, приподнимают мозг, пересекают перекрест зрительных нервов и затем переносят его на стерильную чашку Петри для взвешивания.

4.4.15. Для приготовления антигена головной мозг после взвешивания помещают в стерильную ступку или гомогенизатор и измельчают. К измельченному мозгу добавляют дистиллированную воду, содержащую 0,5% фенола до получения 10%-ной мозговой суспензии. Суспензию мозга фильтруют через тройной слой марли. Стерильность мозговой суспензии проверяют посевом на сахарный бульон, мясопептонный агар и мясопептонный бульон с 0,1% агара и кусочками мяса. Посевы выдерживаются при 37 °С в течении 5 сут. Разрешается для иммунизации лошадей-продуцентов использовать стерильный антиген, сохранившийся при температуре 4 °С не более 14 сут.

4.4.16. Для приготовления исходных культур фиксированного вируса бешенства головной мозг кролика помещают в стерильную ступку или гомогенизатор и измельчают. К измельченному мозгу добавляют дистиллированную воду до получения 10% мозговой суспензии. Стерильность мозговой суспензии проверяют посевом на сахарный бульон, мясопептонный агар и мясопептонный бульон с 0,1% агара и кусочками мяса. Мозговую взвесь разливают стерильно по аликвотам объемом 4-5 мл и замораживают при температуре не выше минус 18 °С. Оптимальной температурой для хранения штаммов фиксированного вируса бешенства является минус 70 °С. Для заражения достают одну аликвоту из морозильника и помещают в холодильник на 4 °С на 18-20 ч. После оттаивания осторожно пастеровской пипеткой отбирают среднюю фазу мозговой суспензии, содержащую максимальное количество вируса.

4.4.18. Правила вскрытия мышей. Мышей забивают в состоянии выраженных терминальных симптомов бешенства хлороформом. Труп мыши фиксируют на дощечке спиной кверху. Для этого необходимо две булавки - одной прикалывают основание хвоста, другой - кончик морды. Можно пользоваться и тремя булавками, чтобы фиксировать передние лапы и хвост. После обработки спиртом кожу головы и шеи отпрепаровывают с помощью ножниц и пинцета, открывая череп. Череп зажимают в глазницах хирургическим пинцетом, изогнутыми ножницами отделяют крышку черепа, обнажая мозг. С помощью тех же изогнутых ножниц извлекают мозг и переносят в стерильную чашку Петри, которую заранее взвешивают. Производят взвешивание чашки Петри с мозговой тканью. Затем мозг переносят в стерильную ступку, где с помощью стерильного пестика приготавливают 10%-ную мозговую взвесь с добавлением дистиллированной воды. Взвесь разливают по аликвотам и хранят при температуре не ниже минус 18 °С, Оптимальной температурой для хранения штаммов фиксированного вируса бешенства является минус 70 °С.

4.4.19. По окончании работы все объекты с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства должны быть убраны в хранилища (холодильники, термостаты, шкафы и т.д.); в обязательном порядке проводится дезинфекция рабочих поверхностей столов 3%-ным раствором хлорамина.

4.4.20. Использованные пипетки полностью (вертикально) погружаются в дезинфицирующий раствор (3%-ный хлорамин), избегая образования в каналах пузырьков воздуха. Длительность дезинфекции 60 мин.

4.4.21. Использованная посуда, твердые отходы из "заразной" зоны лаборатории должны собираться в закрывающиеся емкости и передаваться в автоклавную или дезинфицироваться на месте. Слив необеззараженных жидкостей в канализационную сеть запрещается.

4.4.22. Перенос производственных штаммов фиксированного вируса бешенства и использованной посуды для обеззараживания должен осуществляться в закрытых емкостях, исключающих инфицирование персонала во время транспортирования. После завершения работы помещение "заразной" зоны лаборатории запирается и опечатывается. Опечатывание и снятие печатей производят сотрудники лаборатории, имеющие разрешение руководителя лаборатории (подразделения).

4.4.23. Иммунизацию лошадей-продуцентов осуществляют согласно регламента производства "Иммуноглобулина антирабического жидкого из сыворотки крови лошади".

4.4.24. Правила введения антигена. Введение антигена лошади производится в специально оборудованном помещении (операционной). Сотрудники, осуществляющие инъекцию антигена, одеты в противочумный костюм 3-типа с резиновыми перчатками. Для введения антигена используют прибор для массовых прививок ПМП-1, который соединяется посредством силиконового шланга с иглой и флаконом с антигеном. Вся инъекционная система соединяется герметично. Место введения антигена предварительно обрабатывают 70%-ным раствором спирта. Иглу вводят подкожно и под небольшим давлением медленно вводят антиген. После инъекции вентилем перекрывают подачу антигена, кожу на месте введения иглы зажимают кровоостанавливающим пинцетом на 1 мин. Пинцет снимают, место инъекции обрабатывают тампоном, смоченным 70%-ным раствором спирта, и накладывают тампон с коллодием или фурапластом с перхлорвинилом. После использования вся инъекционная система подвергается кипячению в течение 30 мин в 2%-ном содовом растворе. В процессе гипериммунизации постоянно следят за общим состоянием и температурной реакцией продуцентов. В случае повышения температуры очередную инъекцию антигена производят после ее снижения до нормы.

4.4.25. Хранение производственных штаммов фиксированного вируса бешенства осуществляется в помещениях заразной зоны. Хранение, учет, передача, транспортирование и уничтожение производственных штаммов фиксированного вируса бешенства проводятся в соответствии с требованиями СП 1.2.036-95 .

4.4.26. Прием посетителей разрешается только в специально отведенных местах в "чистой" зоне лаборатории.

4.4.27. Вынос из лаборатории оборудования, лабораторной или хозяйственной посуды, инструментов и др. производится только после их дезинфекции и с разрешения ее руководителя.

4.4.28. В "заразной" зоне лаборатории запрещается:

- оставлять после окончания работы на рабочих местах посуду с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства "Москва" и "CVS";

- пипетировать ртом, переливать жидкий инфекционный материал через край сосуда (пробирки, колбы, флакона);

- хранить верхнюю одежду, головные уборы, обувь, зонты, хозяйственные сумки, косметику и т.п., а также продукты питания;

- курить, пить воду;

- оставлять без надзора рабочее место во время выполнения любого вида работ с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства;

- сливать жидкие отходы (инфицированные жидкости, исследуемый материал и т.д.) в канализацию без предварительного обеззараживания.

4.4.29. Допускается в одном и том же помещении проведение экспериментальных и производственных работ с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства. Экспериментальная и производственная работа должны быть разнесены по времени. Экспериментальный материал должен храниться отдельно от производственного в специально отведенном для него холодильнике или термостате.

4.4.30. Все сотрудники, работающие с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства, должны находиться на диспансерном наблюдении. Периодические медицинские осмотры проводятся в соответствии с действующими приказами (N 280/88 - Минздравмедпром и Госкомсанэпиднадзор России).

4.5. Требования к порядку использования средств индивидуальной защиты (СИЗ)

4.5.1. Сотрудники лаборатории должны быть обеспечены медицинскими халатами, пижамами (комбинезонами), шапочками, сменной обувью и другими средствами индивидуальной защиты в зависимости от характера выполняемых работ и в соответствии с действующими нормами.

4.5.2. Рабочая одежда и обувь должны быть индивидуальными, соответствовать размерам работающих и храниться отдельно от личной одежды.

4.5.3. При проведении исследований в боксированных помещениях производится смена медицинского халата на противочумный или хирургический, доходящий до нижней трети голени. Дополнительно используются резиновые перчатки, тапочки и, при необходимости, респираторы (маски). Операции, требующие вскрытия черепа и позвоночника необходимо проводить в резиновых перчатках, защитных очках и в противочумных халатах. Необходимо также надевать резиновые или прочные полиэтиленовые фартуки, которые легко дезинфицировать или уничтожить.

4.5.4. Смена рабочей одежды должна проводиться по мере загрязнения, но не реже 1 раза в неделю.

4.5.5. Перед сдачей в стирку защитная одежда должна быть обеззаражена замачиванием в растворе 1%-ного хлорамина.

4.6. Требования к обеззараживанию материала и уборке помещений

4.6.1. Дезинфекцию различных объектов при работе с производственными штаммами фиксированного вируса бешенства проводят в соответствии с характером объекта, подлежащему обеззараживанию.

Таблица

Возбудитель болезни - РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Lissavirus семейства Rabdoviridae. Как и другие рабдовирусы, он имеет пулевидную форму. Длина вирионов - 180 нм, диаметр - 75 - 80 нм. Вирус удается культивировать в развивающихся куриных и утиных эмбрионах, в культурах некоторых клеток. Штаммы возбудителя бешенства, циркулирующие в природе (уличный вирус), патогенны для всех теплокровных животных. В наиболее высоких титрах вирус накапливается в центральной нервной системе зараженных животных, особенно в аммониевых рогах и коре больших полушарий головного мозга, в мозжечке и продолговатом мозге. Высокий титр возбудителя бешенства и в слюнных и слезных железах. Различают «дикий» (уличный) и «фиксированный» вирусы бешенства. Уличный вирус бешенства циркулирует в естественных условиях и характеризуется высокой патогенностью для людей и животных, образует в мозговых клетках специфические тельца Бабеша - Негри. «Фиксированный» вирус был получен Л. Пастером путем многоразового интрацеребрального пассажа вируса уличного бешенства через организм кролей, вследствие чего вирус потерял свою вирулентность для человека и животных, а также способность образовывать в мозге тельца Бабеша - Негри. Фиксированный вирус используется как исходный материал для изготовления антирабических вакцин. Все 7 серотипов полевых штаммов вируса бешенства, которые были изолированы от людей, животных и грызунов в Центральной Европе, от летающих мышей в Нигерии, от африканских землероек, а также от комаров и москитов в Нигерии и Судане, от коней в Нигерии, имеют широкую антигенную вариабельность и родственные связи в иммунобиологическом отношении, а прививка животных антирабической вакциной из пастеровского штамма создает иммунитет против вируса бешенства, выделенного в разных частях мира.

Реакции преципитации (РП ) предложены Краусом (1897) и основаны на феномене образования видимого осадка (преципитата) или общего помутнения среды после взаимодействия растворимых либо находящихся в коллоидном дисперсном состоянии Аг с AT. РП ставят в специальных узких пробирках. В качестве реагентов используют гипериммунные преципитирующие сыворотки с высокими титрами AT к гомологичным Аг. При постановке РП разводят не сыворотку, а Аг. Реакционная среда должна содержать электролиты (физиологический раствор) и иметь нейтральный рН. РП позволяет быстро (в течение нескольких секунд) выявлять незначительные количества Аг. Они очень чувствительны, и их применяют для тонкого иммунохимического анализа, выявляющего отдельные компоненты в смеси Аг. Метод имеет несколько разновидностей (рис. 10-16). Реакция кольцепреципитации: На слой антисыворотки наслаивают жидкость, содержащую растворимый Аг, и через несколько секунд наблюдают образование кольца преципитата. Цели: индикация, идентефикация, титрование антиген или антитела. Сущность: АГ и АТ движутся на встречу друг к другу и при специфичности в месте соединяются в комплекс АГ+АТ в виде светлой полосы.

Сем. Тогавирусов (вирусная диарея крупного рогатого скота)

(Togaviridae), семейство вирусов, состоящее из родов Alphavirus, Flavivirus, Rubivirus и Pestivirus. Вирусы содержат однонитчатую РНК с мол. м. 3-4 X 106 дальтон, линейной формы, к-рая является инфекционной. Вирионы диам. 50-70 нм (альфавирусы), 40-50 нм (флявивирусы), 70 нм (рубивирусы), 40 нм (пестивирусы). Для капсида альфавирусов свойствен икосаэдральный тип симметрии. Сборка вирионов происходит в цитоплазме клеток на мембранных структурах. У флявивирусов в составе вириона имеются 3 структурных белка, у альфавирусов 2-3. При репликации в клетках вирусы обоих родов индуцируют образование РНК-зависимой РНК-полимеразы. Вирусы чувствительны к действию жирорастворителей. Этиология. Возбудитель болезни - сферич. РНК-содержащий вирус рода Pestivirus сем. Togaviridae. Величина вирусных частиц 30-40 нм. Вирус может годами сохраняться при t ниже 20°С, в культуральной жидкости не теряет биол. активность до 1 года, в крови, лимфатич. узлах, селезёнке и др. патол. материале - до 6 мес. При t 25 °С в течение 1 сут вирус практически не снижает биол. активности, при t 37 °С погибает через 5 сут. Вирус чувствителен к эфиру, хлороформу, трипсину и дезоксихолату натрия. Эпизоотология. В естеств. условиях В. д. к. р. с. болеют кр. рог. скот, буйволы, олени и косули. Наиболее восприимчивы животные в возрасте от 6 мес до 2 лет. Источник возбудителя инфекции - больные животные.

48.Сплит-вакцины, методы получения .

Сплит-вакцины или расщеплённые (Ваксигрип, Бегривак, Флюарикс) содержат разрушенные инактивированные вирионы вируса гриппа - в её состав входят все вирионные белки вируса, не только поверхностные, но и внутренние антигены. За счёт высокой очистки в ней отсутствуют вирусные липиды и белки куриного эмбриона. Сплит-вакцины или расщеплённые (Ваксигрип, Бегривак, Флюарикс) содержат разрушенные инактивированные вирионы вируса гриппа - в её состав входят все вирионные белки вируса, не только поверхностные, но и внутренние антигены. За счёт высокой очистки в ней отсутствуют вирусные липиды и белки куриного эмбриона. Преимущество сплит-вакцин в том, что они содержат как наружные, так и внутренние антигены вируса гриппа, при этом они избавлены от самого главного недостатка цельновирионных вакцин – наличия токсинов. Сплит-вакцины можно применять с 6-месячного возраста, они рекомендованы для предотвращения гриппа у беременных женщин. Наличие открытых для иммунной системы внутренних антигенов вируса гриппа (нуклеокапсида и матриксного белка) делает сплит-вакцины уникальными. Они защищают не только от ежегодных мутаций вируса гриппа, но частично и от всех возможных разновидностей вируса, поскольку внутренние антигены подвержены лишь незначительным мутациям. По сути дела, сплит-вакцины представляют собой «золотую середину» в профилактике гриппа, поскольку по уровню побочных реакций аналогичны субъединичным вакцинам, а по иммунологической эффективности – цельновирионным. Профилактическая эффективность вакцин этого класса колеблется в интервале от 75 до 96%. Классическим примером препаратов этого класса является французская вакцина Ваксигрип, компании Санофи Пастер (подразделения СанофиАвентис), которая присутствует на рынке Европы уже более 60 лет. Вслед за этой вакциной, другие производители также наладили выпуск сплит-вакцин. В России на сегодняшний день, сплит-вакцины не выпускаются отечественными производителями, а лишь переупаковываются из импортируемого сырья (Бегривак). В 2009 году китайский производитель зарегистрировал свою вакцину Флюваксин.

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

1. ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА

3.1 Устойчивость вируса во внешней среде

6. КЛИНИЧЕСКОЕ ПРОЯВЛЕНИЕ

7. ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ

10. ПРОФИЛАКТИКА И МЕРЫ БОРЬБЫ

Одна из самых опасных и тяжелых инфекционных болезней человека и животных. Протекает бешенство с признаками поражения центральной нервной системы, характеризующимися необычным поведением, непровоцируемой агрессивностью, параличами (полиэниефаломиелитом).

Болезнь у животных чаще всего заканчивается смертью.

Проблема борьбы с бешенством до настоящего времени остается одной из важнейших в мире. Особая опасность бешенства состоит в том, что до настоящего времени не найдено эффективных средств лечения уже развившегося болезнетворного процесса. Поэтому, больных бешенством животных, лечить запрещено, узаконено их немедленное уничтожение.

Из сказанного видно, какое громадное значение приобретает профилактика бешенства — специфическая (вакцинация), а так же меры общей профилактики.

Особое место проблема бешенства занимает и потому, что ежегодно в мире от него погибает 3-6 тысяч животных. В Иране за 5 лет подтверждено заболевание у 82 тысяч животных.

История учения бешенства чрезвычайно интересна и богата многочисленными фактами, открытиями, которые, в конечном счете, привели к тому, что вследствие изобретения надежных вакцин для предупреждения бешенства. И в этой связи необходимо вспомнить и почтить бесценную заслугу перед человечеством Л. Пастера — создателя первой вакцины против бешенства.

В это же время появилось ряд работ, имеющих громадное значение в познании бешенства; следует отметить работы, результаты которых не потеряли значения и в настоящее время. Доказано, что кормление собак мясом от больных бешенством животных не вызывает заражения собак. (У Бучнева — соль-лизунец лизали больные коровы, а затем здоровые — и не заразились). Не заражаются овцы, если им внутривенно вводить слюну от больных животных. Француз Гольтье показал значение новых путей в распространении возбудителя бешенства в организме, он вводил слюну больных животных в седалищный нерв кроликов и воспроизводил болезнь. Дюбуа установил заразительность головного и спинного мозга животных погибших от бешенства.

Эти работы имели важное значение в подготовке великих открытий Луи Пастера. Период открытий Пастера — это следующий этап в истории изучения бешенства (1881 — 1903 гг.). Пастер установил вирусную этиологию бешенства в 1881-1889гг. Со своими учениками он убедительно доказал тропизм возбудителя бешенства к нервной ткани — особенно к ткани головного и спинного мозга, поскольку постоянным местонахождением возбудителя бешенства в организме больного животного является центральная нервная система. В 1890 г. ученики Пастера Ру и Нокар установили, что слюна больных животных становится заразительной за 3-8 дней до клинического проявления болезни. Это имеет большое практическое значение.

Пастер доказал возможность воспроизведения заболевания при введении под твердую мозговую оболочку здорового кролика кусочков мозга бешенного животного (путем интрацеребрального введения материала). Причем Пастер установил, что в ходе таких пассажей через мозг кроликов можно изменить биологические свойства вируса. Срок развития болезни с момента заражения кролика постепенно при пассажах уменьшается, так к 133 пассажу срок сократился с 18-21 дней до 6-7 дней, дальнейшего сокращения сроков инкубационного периода Пастеру добиться не удалось, т.к. и на 178 пассаже инкубационный период оставался таким же.

Полученный таким образом штамм неизменно вызывал болезнь у кроликов через 6-7 дней, в связи, с чем он был назван «фиксированным» (Virus fixs).

Фикс вирус настолько адаптировался к центральной нервной системе, что уже не вызывал болезнь у кроликов, собак и других животных если его вводили им подкожно в обычных летальных дозах. Так была получена возможность вводить V.f. для создания иммунитета у животных и людей.

6 июля 1885 года — знаменательный день в истории медицины. К Пастеру обратилась мать 9-летнего Иозефа Мейстера из Эльзаса. За 2 дня до этого ребенок был искусан бешеной собакой. Пастер верил в действенность своей вакцины, мальчик же все равно был обречен на смерть. Пастер решил применить свой метод. Два профессора констатировали, что у ребенка 14 рваных ран нанесено животным, обработка их ничего бы не дала, оба профессора единогласно признали, что ребенок обречен на смерть, и прививки Пастера не могут ухудшить положения, поэтому они не возражают против них.

20 дней после прививок были очень тяжелыми в жизни Пастера, он лишился сна, отказался от пищи, его мучила мысль, что мальчик может погибнуть от смертельных доз вируса, которые ему ввели в ходе прививок. Но состояние мальчика осталось хорошим и после дня предполагаемого кризиса отпали сомнения, что появятся признаки болезни.

Ребенок бешенством не заболел, так как при длительном инкубационном периоде при бешенстве фикс вирус создает иммунитет (инкубационный период 6-7 дней).

Среди учеников Пастера были выдающиеся русские ученые Мечников и Гамалея, по их инициативе в 1886 году в Одессе была открыта II пастеровская станция.

С начала нашего века и до сих пор изучают вопросы и совершенствуют методы диагностики болезни. Важным моментом при диагностике явилось открытие в ганглиозных клетках головного мозга и в аммоновых рогах, погибших от бешенства животных, эозинофильных проплазматических включений Бабешем (румынский исследователь) в 1887 г., а позже подробно их описал итальянец Негри (1903). В настоящее время обнаружение микроскопическим исследованием телец Бабеша Негри имеет большое диагностическое значение.

В 1889 году Бабеш и Ленц в крови иммунизированных животных выявили рабицидные антитела, что имело большое практическое значение в дальнейшем.

В 1903 году Ремленже доказал, что возбудитель бешенства относится к фильтрующимся вирусам.

Начиная с 20-х годов нашего столетия до настоящего времени ученые мира продолжают изучать бешенство, углубляя свои знания о болезни. При помощи электронного микроскопа и культивировании на культурах ткани установлена легкая изменчивость биологических свойств вируса. Изучены атипичные формы этой болезни. Установлена положительная роль антител.

В нашей стране разработаны схемы мероприятий по ликвидации болезни, которые привели к значительному снижению распространения ее, по сравнению с началом 20 века. Постоянно изучается эпизоотология бешенства и проводится анализ эпидемиологической обстановки.

В ликвидации бешенства в нашей стране (в ряде областей центральной Европейской части и областей Востока) сыграла введенная в 1951-1952 г.г. профилактическая вакцинация собак. Но, несмотря на достигнутые успехи, проблема бешенства до конца не решена, она стала очень актуальной в связи с прогрессирующим распространением болезни среди диких животных, так называемое «природное бешенство», эпизоотия которого началась 20 лет назад и нет данных о ее угасании. Эпизоотия среди диких животных привела к росту заболеваемости сельскохозяйственных животных, прежде всего — крупного рогатого скота.

По данным МЭБ благополучны по бешенству — Ирландия, Англия, Швеция, Финляндия, Испания, Гибралтар, Кипр, Дания, Люксембург. Очень неблагополучна обстановка в Польше (в 1971 году — 959 случаев бешенства); 14 провинций из 19 неблагополучны в Венгрии; в Болгарии, Албании, Греции, Югославии — единичные случаи от 1 до 16.

В ГДР и ФРГ после второй мировой войны эпизоотия бешенства отмечена среди диких животных (до 1402 случаев — в ГДР, в ФРГ — 1767 случаев — в 1971 году).

В 1988 году (16 мая — МЭБ) зарегистрированы случаи в ФРГ, Бельгии, Италии, но наблюдали сокращение числа очагов, так как была введена оральная иммунизация лисохвостых. Но остается опасной обстановка в Чехословакии, Турции и Нидерландах (здесь летучие мыши — являются основным источником вируса).

В Азии в 1982 году отмечали 16% случаев бешенства, по сравнению ко всем случаям, отмеченным в мире.

Сейчас, на фоне резкого сокращения заболевания собак, участились случаи бешенства крупного рогатого скота, диких животных и кошек, то есть в нашей стране стало преобладать бешенство диких животных — лисиц и енотовидных собак. Центр переместился в сельские местности.

Вирус, выделенный от животных разных видов, обладает неодинаковой вирулентностью, наиболее вирулентен вирус от волка, собаки; слабее от — лошади, человека, быка, барана.

Культивируется вирус в живых клетках, для накопления больших количеств вируса (при производстве вакцин) — непосредственно заражают животных в мозг.

Изменчивость — одно из важнейших биологических свойств вируса бешенства.

Пример тому — фикс вирус, который отличается по свойствам от эпизоотического («уличного»):

1) коротким инкубационным периодом у зараженных животных — 4 — 7 дней, (уличный 12-25 дней);

2) фикс вирус — обладает повышенным нейротропизмом;

3) почти не выделяется со слюной;

4) тельца Бабеша-Негри обнаруживаются чрезвычайно редко;

5) болезнь протекает в паралитической форме;

6) в естественных условиях этот вирус передаваться не может;

7) некоторые штаммы фикс вируса непатогенны даже для кроликов. Кроме фикс вируса в природе существуют 5 групп вирусов, отличающиеся по патогенности и, вызывающие дикование у животных, но человек к ним не восприимчив.

Устойчивость вируса во внешней среде

Химические вещества: 5% раствор NaOH, формалин, 3-5% раствор соляной кислоты разрушают вирус через 5-10 минут, эфир — 120 часов, 1%-ный раствор перманганата калия — 20 минут, быстро разрушает вирус раствор хозяйственного мыла.

Вирус устойчив к фенолу, йоду, антибиотикам. 1%-ный фенол инактивирует вирус через 8 недель при t — 4°C, 18-20°C — через 14 дней.

Наиболее чувствительны крысы, крупный рогатый скот.

Независимо от породы и пола животного — более чувствителен молодняк, т.к. менее защищен ввиду отсутствия иммунитета. У него инкубационный период менее продолжительный.

Решающую роль в поддержании эпизоотии играют определенные виды диких животных. В России уничтожение волков, запрещение охоты на лисиц привело к увеличению их числа, они стали резервуаром бешенства в природе. В нашем регионе чаще всего распространяют бешенство: красная лисица, корсаки, реже — волки, енотовидная собака. Лисица вовлекает в эпизоотическую цепь представителей семейства куньих, барсуков (общие норы с лисицами) и домашних животных, которые кусают на пастбищах скот или проникают в населенные пункты, животноводческие помещения, где на лисиц нападают собаки, заражаясь бешенством.

Лисицы и корсаки с наступлением холодов проникают на места стоянок скота, представляя опасность распространения бешенства, они могут мигрировать на 30-40 и до 70 км. В связи с тем, что источником возбудителя инфекции являются дикие животные, среди них вирус бешенства циркулирует, передается от животных одной популяции из поколения в поколение, а от диких передается домашним животным и человеку.

Болезнь протекает у с-х животных чаще всего спорадически, но иногда отмечают энзоотии.

После проникновения в организм вирус некоторое время находится в тканях не размножаясь, а затем исчезает, через 24-96 часов его не удается обнаружить в ткани ворот инфекции. Оболочка вириона лизируется и он проникает в нервную ткань, по которой продвигается к центральной нервной системе по периферическим нервам со скоростью 3 мм/час (это еще установлено Ру и Пастером).

В мозге происходит размножение вируса. Достигнув определенной концентрации по нервным волокнам, вирус проникает во внутренние органы, чем ближе к голове орган, тем раньше в него попадает вирус, вызывая генерализацию процесса, охватывая всю вегетативную и периферическую нервную систему. Так он попадает в слюнные железы и слюну.

Вирус в организме зараженного животного распространяется не только по нервным путям, но и по лимфогематогенным, о чем в ходе развития инфекционного процесса свидетельствует непродолжительная виремия.

Что же происходит в клетках. Когда вирус проникает в клетку он вступает в тесную взаимосвязь с клеткой. Вирус специфическая РНК диффузно синтезируется в цитоплазме клетки и аккумулируется в форме крупных включений РНК. Эти включения окрашиваются по Гимза в синий цвет. Скопления вируса и гомогенные вещества — тельца Бабеша-Негри и образуются, как в самом нейроне, так и снаружи.

Вирус, воздействуя на важнейшие отделы головного мозга — клетки аммоновых рогов, продолговатого мозга, мозжечка ядра черепно-мозговых нервов, вызывает их раздражение, что обуславливает повышенную рефлекторную возбудимость, агрессивность, судороги. В клетках происходят дегенеративные процессы, они необратимы, а это сопровождается параличами.

Воспалительно-дегенеративные процессы в клетках продолговатого мозга приводят к повышению температуры, усиленному отделению пота, слюны.

По данным Н.Ф. Гамалея через 3 недели в крови больных животных удается обнаружить рабицидные антитела. В молоке и моче вирус чаще всего не содержится (редко в моче).

Иммунная перестройка. Вирус бешенства содержит гликопротеидный антиген вирусной мембраны, он способен вызывать образование вируснейтрализующих антител, защищающих животных от заражения. Нуклеокапсидный антиген — продуцирует преципитирующие и комплемент связывающие антитела, не обладающие нейтрализующей способностью. Кроме этого, появляются литические антитела, разрушающие клетки, зараженные вирусом.

Вирус бешенства способен вызывать образование интерферона, с помощью которого животные могут защищаться от инфекции экзогенным и эндогенным интерфероном. Одним из свойств интерферона обладает вакцина.

1) от возраста животного, чем моложе животное, тем период короче;

2) степени индивидуальной восприимчивости (так 1% собак естественно устойчивы к вирусу бешенства);

3) характера укуса — наличие или отсутствие нервно-рецепторной зоны, глубины укуса;

4) условий содержания, ослабляющих центральную нервную систему — утомление, голод;

5) количества и биологических свойств, попавшего в организм вируса бешенства.

Клинические формы бешенства. Абортивная — после появления типичных признаков наступает выздоровление. Атипичная — хроническая с прогрессирующим исходом, атрофией мускулатуры. Буйная (наиболее типична): три периода — предвестников, возбуждения и параличей. Тихая — менее выражен или отсутствует период возбуждения.

Клинические признаки у разных видов животных.

У сельскохозяйственных животных абортивное течение наблюдают редко, оно заканчивается либо выздоровлением, либо возвратным бешенством.

У крупного рогатого скота — буйство характеризуется стремлением сорваться с привязи, хриплым ревом, безудержным движением вперед. Животные бьют ногами землю, бросаются на людей и других животных. Слюнотечение, глаза на выкате, зрачки расширены. Буйство сменяется состоянием покоя, развиваются параличи нижней челюсти, языка, мускулатуры задних конечностей.

Можно наблюдать паралитическую форму, при которой клинические признаки слабо выражены. Отмечают хриплое мычание, извращение аппетита, отсутствие жвачных периодов, быстрое развитие параличей и гибель на 2-4 день.

У овец болезнь протекает, как и у крупного рогатого скота, но возбуждение выражено слабее. Агрессивность. Быстро развиваются параличи и на 3-5 день наступает смерть, козы гибнут на 3-8 день.

У свиней болезнь обычно протекает при резко выраженной буйной форме. Отмечается слюнотечение, извращенный аппетит и агрессивность. Иногда свиньи двигаются на согнутых передних конечностях. Быстро развиваются параличи, и животное гибнет на 2-4 день.

7 . ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ

Труп вскрывать следует с предосторожностью! Труп истощен, шерсть взъерошена, обильно смочена в отдельных местах слюной, кожа часто травмирована.

Цианоз или гиперемия слизистых оболочек. Иногда на слизистой оболочке ротовой полости находят язвы и эрозии. В желудке кормовых масс чаще нет, зато можно обнаружить несъедобные предметы. На слизистой оболочке множественные кровоизлияния. Отек мягкой мозговой оболочки, извилины головного мозга сглажены.

При гистологическом исследовании головного мозга в цитоплазме нейронов — тельца Бабеша-Негри, обнаруживаемые только при бешенстве, но не во всех случаях, а лишь у 70-40% животных. В одной клетке их может быть несколько, различной формы — округлые, удлиненные, плотной консистенции, устойчивы к гниению. Чем дольше продолжается болезнь, тем больше возможности их обнаружить. У взрослых животных включений больше, чем у молодых. Если животное убито в начале болезни, то тельца не находят, поэтому собак не убивают при неясных клинических признаках, а наблюдают за ними 10 дней, дают проявиться клиническим признакам. У диких животных тельца обнаруживают реже, лишь у 30% больных животных.

Клинические признаки типичны — возбуждение, агрессивность, слюнотечение, параличи глотки, гортани, нижней челюсти.

Но окончательный диагноз ставят только по результатам лабораторных исследований, а правильность его зависит от правильности отбора и транспортировки материала (ст.8 п.6 инструкции).

Гистологическое исследование с целью обнаружения телец Бабеша-Негри.

Реакция диффузной преципитации в агаровом геле (Бучнева) в материале выявляют вирусный антиген при помощи заведомо известного преципитирующего антирабического глобулина — антитела.

Метод флюоресцирующих антител основан на обнаружении вирусного антигена в патматериале.

Реакция нейтрализации. Биопробу проводят на белых мышах, которых заражают интрацеребрально и подкожно, наблюдают 50-60 дней.

В иммунитете при бешенстве развивается явление интерференции, когда на внедрившийся в клетку вирус вырабатывается интерферон — вещество, исключающее возможность жизнедеятельности вируса.

Вот почему при данной болезни возможна постинфекционная вакцинация, фикс вирус, проникая в нервные клетки раньше, чем полевой штамм, заставляет их вырабатывать интерферон, который инактивирует вирус дикого бешенства. На фикс вирус раньше вырабатываются антитела, так как он раньше (в течение 6-7 дней) достигает лимфоидных органов и мозга.

В настоящее время для иммунизации домашних животных применяют две вакцины — антирабическая сухая вакцина и антирабическая вакцина АЗВИ.

Первую применяют при вынужденных прививках по схеме — 1-2 раза — три дня подряд, а вторую используют для профилактической вакцинации.

Так как в эпизоотическую цепь включаются дикие животные, то встает вопрос о создании у них иммунитета.

В Белоруссии проводится довольно эффективная иммунизация волков против бешенства.

Важно своевременное выявление больных животных, изоляция подозреваемых в заболевании и заражении. Охрана сельскохозяйственных животных от нападения больных, утилизация трупов.

С целью профилактики «дикого бешенства» — отлов, отстрел, дегазация нор, пероральная иммунизация, аэрозольная иммунизация летучих мышей в пещерах, иммунизация крупного рогатого скота.

Убой бродячих собак, кошек, вакцинация. Трупы сжигают, дезинфекция места, одежды, навоза, корма. Контроль за покусавшими — 10 дней.

Все это меры борьбы с бешенством.

Изучение бешенства в XIX веке. Варианты вируса бешенства. Очистка и концентрация культурального вируса. Размножение вируса бешенства. Химическая структура и биологическая активность субвирусных компонентов. Инкубационный период и стадии заболевания.

Бешенство как острая инфекционная болезнь, вызываемая нейротропным вирусом, таксономия. Морфология вириона. Этапы репродукции вируса и органного патогенеза. Механизм его обнаружения у животных и человека, принципы постановки диагноза и схема лечения.

Проникновение в организм вируса бешенства. Источники вируса бешенства. Как происходит заражение от больного животного. Инкубационный период и первые симптомы. Основные периоды болезни. Предотвращение болезни путем введения вакцины против бешенства.

Первые симптомы бешенства, возникающего после укуса зараженного животного. Инкубационный период болезни. Источники вирусного заболевания. Изучение чувствительности вируса к ультрафиолетовым, прямым солнечным лучам и этанолу. Методы лечения бешенства.

Краткая история бешенства как заболевания человека и теплокровных животных. Этиология, патогенез и способы передачи инфекции бешенства. Инкубационный период и клинические симптомы заболевания. Методы диагностики, лечения и профилактики бешенства.

Бешенство у собак. Первое клиническое описание бешенства у человека. Заражение животных и человека при укусе или ослюнении больным животным поврежденных кожных покровов. Клиническая картина бешенства. Профилактика и лечение заболевания у человека.

Общая характеристика бешенства, его возбудитель. Эпизоотологическое обследование г. Абакана. Наличие природного очага и предрасполагающих природно-географических условий возникновения бешенства в регионе. Противоэпизоотические мероприятий при бешенстве.

Характеристика и способы передачи возбудителя бешенства. Механизм размножения и распространения вируса, инкубационный период. Признаки заболевания человека. Диагностика, лечение и профилактика болезни. Условные и безусловные курсы антирабических прививок.

Эпидемиологическая ситуация по заболеваемости бешенством в РФ. Клинико-патогенетическая характеристика болезни. Схемы развития и факторы эпидемиологического процесса. Программа ликвидации и профилактики бешенства. Мероприятия в эпидемическом очаге.

ВИЧ-инфекция - хроническая инфекционная болезнь, вызываемая вирусом иммунодефицита человека. Показатели ее распространенности. Источник возбудителя болезни, пути передачи вируса, восприимчивость к инфекции. Принципы профилактики ее распространения.

otherreferats.allbest.ru

4.1 Устойчивость вируса во внешней среде.

Вирус бешенства не устойчив к высокой температуре (t – 50°С инактивирует за 1-1,5 часа, 60°С — 5-10 минут, 80-100°С — мгновенно). Низкие температуры консервируют вирус, так как ферментативные процессы приостанавливаются, (при 4°С в кусочке мозга — несколько месяцев, — 20-40°С — несколько лет (5)). Лиофильно высушенный — 3-4 года. Под воздействием ультрафиолетовых лучей вирус погибает в течение 5 минут, прямые солнечные лучи быстро инактивируют.

Химические вещества: 5% раствор NaOH , формалин, 3-5% раствор соляной кислоты разрушают вирус через 5-10 минут, эфир — 120 часов, 1%-ный раствор перманганата калия — 20 минут, быстро разрушает вирус раствор хозяйственного мыла.

Вирус устойчив к фенолу, йоду, антибиотикам. 1%-ный фенол инактивирует вирус через 8 недель при t — 4° C , 18-20° C — через 14 дней.

Вирус бешенства устойчив к гниению и разложению, в мозге трупа животного погибает через 5-90 дней, в мозге закопанного на 1 метр трупа, вирус остается вирулентным 5 недель. Трупы, погибших от бешенства животных особенно опасны в холодное время года.

К бешенству восприимчивы теплокровные животные всех видов, врожденная невосприимчивость у хладнокровных — рыб, лягушек, змей, но в их организме вирус сохраняется длительное время.

Умеренно чувствительны — овцы, козы, лошади.

В настоящее время установлено, что бешенство домашних животных распространяют собаки и кошки; бешенство диких животных — дикие плотоядные; бешенство летучих мышей — летучие мыши-вампиры. Однако, эти эпизоотологические особенности болезни не абсолютные. В круговорот вируса среди диких животных постоянно включаются домашние животные, а домашние плотоядные нередко могут стать источниками возбудителя инфекции для представителей дикой фауны.

Источником возбудителя бешенства служат больные животные, выделяющие вирус главным образом со слюной. При городском бешенстве — источник возбудителя — бродячие и бездомные собаки, их количество и определяет масштабы распространения болезни. Следует учитывать, что больная собака может перенести болезнь на 20-80 км от места заражения. Места скопления пищевых отходов привлекают в городах массу бродячих собак, что очень опасно.

При диком бешенстве болезнь распространяют дикие животные, которые склонны к дальним миграциям и агрессивности к сородичам и другим видам животных, которые делят с ними жизненное пространство.

Лисицы и корсаки с наступлением холодов проникают на места стоянок скота, представляя опасность распространения бешенства, они могут мигрировать на 30-40 и до 70 км. В связи с тем, что источником возбудителя инфекции являются дикие животные, среди них вирус бешенства циркулирует, передается от животных одной

популяции из поколения в поколение, а от диких передается домашним животным и человеку.

Бешенство (Гидрофобия)

Заболевание бешенством было известно ещё с далёкой древности, и первые упоминания о заболевании, передающемся через укус собак и весьма напоминающим по описанию бешенство, встречаются в клинописных глиняных табличках Древней Месопотамии – относятся к III т. до н.э. Положительные изменения в изучении и борьбе с этими заболеваниями с 1885 год – когда Луи Пастер разработал антирабическую вакцину и, благодаря этим прививкам было предотвращено множество смертей. А чуть позднее 1892 и 1903 г (почти одномоментно) Бебест и Негри описали внутриклеточные включения в нейронах погибших от бешенства, примерно в это же время была доказана вирусная природа возбудителя учёным Ремлеже.

Возбудитель бешенства:

Частицы окружены двухслойной липидной мембраной с выступающими шипами – наличие этого слоя, возможно и предохраняет возбудитель от фагоцитоза.

Наличие гликопротеина G – отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку — если к этой структуре вырабатываются антитела, то происходит нейтрализация вируса организмом;

Выраженное угнетение процессов биосинтеза белка в клетке организм заражённого ведёт к утрате способности регенерации, и это играет свою роль в формировании летального исхода, т.к почти все клетки нашего организма имеют в своём составе белочную структуру;

Наличие тропности (избирательность поражения) вируса к нейронам и клеткам слюнным желёз – эта особенность обосновывает специфику симптомов: тропность к клеткам нервной системы, в том числе и ЦНС, поражает гиппокамп – структура отвечающая за поведение, и при его повреждении человек становится неуправляем и ему хочется всех укусить. А заражение слюнных желёз приводит к тому, что желание укусить становится смертельным для окружающих, даже если произошло просто ослюнение (т.к на контактных местах могут быть микротравмы).

Устойчивость: Вирус не устойчив во внешней среде, единственное, что он может, так это сохраняться в трупах животных до 4 месяцев и при низких температурах. Гибель вируса вызывает: кипячение в течении 2 минут; температура 60°С – в течении 5 минут; действие УФИ, а также дезинфектантов вызывает практически мгновенную гибель вируса.

Восприимчивость к бешенству высокая для всех теплокровных. Половых, возрастных и географических ограничений нет, бешенство распространено на всех континентах. Надежда избежать инфицирования после укуса есть у тех, кто привит (особенно недавно). Отмечена осенне-летняя сезонность из-за увеличения частоты контактов людей с дикими животными и бродячими собаками.

Причины заражения бешенством

Источник и резервуар инфекции в основном – дикие млекопитающие, но могут быть и городские (собаки и другие домашние животные). Пути передачи бешенства – контактный, т.е только после непосредственного ослюнения микротравм кожи/слизистых.

Старайтесь следить за поведением животных, а именно, странности проявляются в следующим: волки спокойны и гуляют в одиночку среди людей, а потом неожиданно нападают; Лисы становятся более ласковыми; У собак (да и у других животных) наблюдается обильное слюнотечение и может быть поджат хвост. Но «странность» поведения не является залогом бешенства.

Инкубационный период от 7 дней до года и более, но чаще 30-90 дней. Это время от внедрения возбудителя до первых симптомов бешенства. Длительность этого периода будет завесить от некоторых факторов: от локализации, от глубины и от обширности укуса, а также от возраста пострадавшего. В особенности локализация и возраст – напрямую предопределяет скорость распространения возбудителя и, чем локализация укуса ближе к голове (т.е повреждение в области рук/шеи/лица), тем быстрее достигает возбудитель мозга, именно из-за короткого пути, и даёт специфические симптомы. Младший возраст также ускоряет появление симптомов, т.к у детей скорость проведения возбуждения выше, нежели у взрослых и это способствует продвижению вируса далее по нервным волокнам.

В этот период происходит проникновение вируса через место укуса и там происходит первичное размножение, после этого вирус проникает в мышечную ткань (при сильных укусах сразу в мышечную ткань), происходит соединение с нервно-мышечными синапсами, проникновение в нервные волокна и распространение по ним возбудителя к ЦНС и клеткам слюнных желёз и, как только возбудитель достигает структур ЦНС, возникает период клинических проявлений (продромальный или период предвестников, период возбуждения и период параличей).

Продромальный период длится в среднем 1-3 дня и один из первых признаков – тканевые изменения в месте укуса и по ходу нервных путей от него, а именно – происходит набухание. Покраснение и зуд в области рубца/места укуса. Эти проявления возможны на фоне небольшого лихорадочного синдрома. Возникает бессонница, подавленность и раздражительность, чувство страха, тоски, повышение чувствительности к слуховым и зрительным раздражителям, гиперестезии воздуха и чувства нехватки воздуха.

Период возбуждения характеризуется возникновением острого энцефалита: приступы психомоторного возбуждения, изменение сознания, галлюцинации, агрессивность, буйство, бредовые идеи, мышечные спазмы, судороги. В этот период возбудитель достигает структур ЦНС и дивиантное поведение говорит о повреждении гиппокампа — это характеризуется попытками больного убежать, укусить, нападать с кулаками. Также стоит упомянуть о бесконтрольной силе, возникающей у заражённых, т.к она достигает таких масштабов, что больные начинают вырывать трубы, отрывать двери и т.д.

Как только возбудитель достигает стволовых структур и по достижению черепных нервов, возникает очаговая неврологическая симптоматика: диплопия, парез лицевых мышц, неврит зрительного нерва, нарушение глотания – каждый из этих симптомов имеет свою специфику проявления, в зависимости от того, какая пара черепных нервов повреждена. Например, самый яркий симптом – слюнотечение и пена изо рта характерна для повреждения языкоглоточного нерва, т.к происходит нарушение тонуса протока слюнных желёз и нарушение глотания. Из-за потерь жидкости через слюну и возможную рвоту, больные хотят пить, но не могут из-за гидрофобии (боязнь воды), помимо этого регистрируется аэрофобия (страх воздуха, его дуновения), также наблюдается страх яркого света (фотофобия) или громкого звука (акустикафобия) – все эти страхи могут вызывать возникновение всё новых и новых приступов. Приступы не постоянны, но легкопровоцируемы и частонарастающие с сокращением интервалов возникновения и сопутствующими судорогами (часто генерализованными).

Паралитическая стадия болезни: судороги и возбуждение прекращаются, и на фоне полного благополучия, которое является мнимым, наступает смерть – часто из-за паралича сосудодвигательного или дыхательного центра.

Все 4 периода могут протекать весьма вариабельно, но как бы там не было исход один – смерть. Возникновение специфических симптомов «включает жизненный таймер» и люди живут не более недели.

Диагностика бешенства

Оговорю сразу, что диагностика часто посмертная, т.к из-за молниеносного течения и тканевой деструктуризации нейроцитов, диагностика, да и лечение бессмысленны и проводятся только для предотвращения распространения заболевания и спасения тех, у кого ещё не начались клинические проявления.

РН (реакция нейтрализации) направлена на определение специфических антител против гликопротеина G (описание в подзаголовке «возбудитель»), при этом материал для исследования – отпечатки роговицы, биоптаты кожи затылка, у невакцинированных больных происходит четырёхкратное нарастание антител при исследовании парных сывороток. У вакцинированных больных обнаруживают абсолютный уровень специфических антител, которые определяются не только в периферической крови, но и в спинномозговой жидкости.

Посмертные методы диагностики бешенства (т.е только после смерти):

ПЦР (полимеразная центральная реакция) направлена на обнаружение РНК-вируса, берутся из биоптатов мозга.

Гистологический метод направленный на обнаружение телец Бабеша–Негри (специфические эозинофильные включения и их появления обусловлено затруднением созревания вирионов в нейроцитах) в мазках-отпечатках головного мозга.

Биологический метод основан на заражении лабораторных животных и обнаружении тех же самых телец Бабеша-Негри, но уже в мозговых тканях умерших животных. Для лабораторных анализов, помимо кусочков мозговой ткани, используют ещё биоптаты слюнных желёз и роговицы.

Специфического лечения нет. Помощь основывается только на том, чтобы ликвидировать патогенез, т.е лечение симптоматическое: установка назогастрального зонда и проведение зондового питания, также проводят инфузионную терапию, противосудорожную и седативную терапию, при необходимости вводят мышечные релаксанты и наркотические средства, проводят ИВЛ. Но такое лечение не позволяет избежать смертельного исхода.

Поэтому сразу после укуса любого животного необходимо проводить лечебно-профилактическую иммунизацию на тот случай, если животное окажется больным.

Профилактика бешенства

Главная цель профилактики – иммунизация, которая может быть профилактической или лечебно-профилактической:

Профилактическая проводится людям с риском заражения: ветеринары, лесники, охотники, собаколовы, работники бойни, сотрудники лабораторий работающих с вирусом бешенства;

Лечебно-профилактическая иммунизация проводится при контакте и укусах людей бешенными, подозрительными на бешенство или неизвестными животными. В этом случае противопоказаний для вакцинации нет, даже при беременности и кормлении её всё равно необходимо проводить – «потерявший головы о волосах не плачет».

Принципы профилактики: края раны не иссекают и не ушивают в первые 3 дня, исключения составляют только некоторые случаи – обширные раны, наложение швов на кровоточащие сосуды, наложение швов на раны лица. После первичной хирургической обработки применяют антирабическую культуральную концентрированную очищенную инактивированную сухую вакцину (КОКАВ) – её вводят по 1 мл в дельтовидную мышцу, а детям – в мышцу бедра. Курс введения приходится на 0, 3, 7, 14, 30 и 90 день итого, вместо пресловутых «40 уколов в живот» в прошлом времени, курс иммунизации составляет всего 6 инъекций.

Антиробический иммуноглобулин гетерологичный (лошадиный) или гомологичный (человеческий) нейтрализует вирус бешенства. Вводят его при тяжёлых множественных укусах и опасной локализации. Его вводят в первые часы после укуса, но не позднее 3 суток с целью создания пассивного иммунитета. Перед проведением иммунизации, с целью избежать анафилактической реакции, используют правила введения по Безредко, а также дозу вводимой вакцины определяют из расчёта 40МЕ/кг – при введении гетерологичного, и 20МЕ/кг – при введении гомологичного иммуноглобулина. Для введения необходимой дозы иммуноглобулина необходимо вес пострадавшего умножить на 40(20)МЕ и разделить полученное число на активность иммуноглобулинов указанную на этикетке. Рассчитанную дозу инфильтрируют вокруг ран и в глубину раны (если всю дозу ввести невозможно по анатомическим соображениям – область глаз, ушная раковина и т.д., оставшуюся дозу вводят внутримышечно в другие места). После применения вакцины иммуноглобулин не водят, совместное введение возможно в тяжёлых случаях (ослюнение и/или укус слизистых, области головы, рук, просто множественные укусы) и при том, иммуноглобулин вводят перед вакциной.

За укусившим животным наблюдают 10 суток и, при появлении первых признаков заболевания, его голову направляют в лабораторию на иммунофлюоресценцию биоптатов головного мозга, с целью обнаружения вируса бешенства. Если же в течении 10 дневного наблюдения, со стороны животного не обнаружилось никаких симптомов, то у человека прекращают начатую иммунизацию. Если же пострадавший ранее был иммунизирован и после его иммунизации прошло менее года, назначают всего 3 инъекции по 1 мл на 0, 3, 7 день. Если прошло более года от иммунизации, то повторную иммунизацию проводят полную.

Вакцинированному следует знать: лечение глюкокортикоидами и иммунодепрессантами следует приостановить, иначе антирабическая иммунизация окажется неэффективной, запрещается применение спирта на всём протяжении иммунизации и на протяжении 6 месяцев после окончания. Исключить все стрессовые реакции.

Осложнения бешенства:

Часто задаваемые вопросы по бешенству

Вопрос: Опасен ли больной для окружающих?

Вопрос: Сохраняется ли иммунитет после иммунизации?

Вирус бешенства – это вирус, обладающий свойствами нейротропности, то есть способностью поражать нервные клетки в организме, вследствие своего проникновения, и вызывать развитие одноименного смертельного заболевания. Возбудитель вируса бешенства может быть чрезвычайно опасным как в отношении человека, так и в отношении диких животных и нескольких видов домашних.

Вирус, вызывающий бешенство известен с древних времён, но достаточно тщательно его изучить удалось только в 1880 году Л. Пастеру. Ему же и принадлежит изобретение знаменитой вакцины против бешенства, которая впервые была успешно введена лишь в 1885 году.

Характерной особенностью вируса бешенства у человека считается его прямое повреждающее влияние на нервную систему с формированием всевозможных неврологических нарушений, повреждением различных органов, тканей организма и развитием летального исхода без правильной профилактики и лечения. Выделяют семь различных генотипов данного вируса, которые широко распространены почти по всему миру.

Что такое вирус бешенства

Возбудитель вируса бешенства – это вирус, принадлежащий к семейству Рабдовирусов, имеющий в своём составе одноцепочечную молекулу рибонуклеиновой кислоты, или, так называемый, РНК-содержащий вирус. Форма его чаще напоминает цилиндрическую или форму пули, поверхность представлена защитной оболочкой. Длина вируса составляет примерно 180 нанометров, а в диаметре он около 75 нанометров. При изучении было установлено, что с одного конца его форма коническая, а с другого чаще несколько вогнутая. В составе вируса имеются липопротеины, представляющие собою сложные белки гликопротеины. Также поверхность вируса покрывают многочисленные шипы, которых нет только на плоском или вогнутом конце. Под оболочкой вируса располагается слой белка, имеющий название мембраны или матрицы. Ядро вируса представлено рибонуклеопротеином, расположенным спирально, в составе которого имеется одноцепочечная рибонуклеиновая кислота или молекула РНК и белки, относящиеся к видам N, L и NS. Также вирус бешенства имеет в своём составе 2 антигена, специфичных для данного вида возбудителя, растворимый и поверхностный.

В результате проникновения в организм человека вирус, вызывающий бешенство, способен образовывать в поражаемых нервных клетках специфические только для данной болезни включения, которые были названы в честь учёных, которые их обнаружили – тельца Бабеша-Негри. Эти тельца имеют достаточно разнообразную форму, но чаще всё же бываю овальными, многоугольными либо сферическими. Их размеры колеблются примерно от 4 до 20 микрометров, также они подвержены воздействию кислых красителей и при исследовании приобретают специфичный красный цвет с рубиновым оттенком. Располагаются эти тельца в цитоплазме нервных клеток, образующих головной мозг. Их можно обнаружить путём проведения посмертного патолого-анатомического исследования в мазках, а также срезах, полученных из ткани головного мозга, из подчелюстных слюнных желез.

Благодаря Реакции Иммунофлюоресценции можно обнаружить антигены вируса бешенства в клетках человеческого организма. Как правило, для этого проводят биологические пробы на мышах. В случае проведения диагностических манипуляций с выделением вируса у живого человека исследуют биоптаты кожи, с применением Реакции Иммунофлуоресценции, отпечатки роговицы, также возможно выделение вируса из цереброспинальной жидкости, слёзной жидкости, из слюны. Также можно с помощью Реакции Связывания Комплемента и Иммуноферментного анализа определять антитела в организме человека к вирусу бешенства при возникновении заражения.

Вирус бешенства как источник заболевания регистрируется практически на всех материках земного шара, исключением является Новая Зеландия, Австралия, а также Антарктида. Общее количество поражаемых им видов животных колеблется в пределах 30.

Переносчики вируса бешенства

Основным источником, а также непосредственным резервуаром вируса бешенства в природе считаются некоторые домашние животные, такие как кошки, собаки, лошади, рогатый скот, а также и дикие животные, к которым относятся волки, лисы. В 1931 году на одном из островов, принадлежащих Индии, бактериолог Л. Паван выделил тельца Негри, формирующиеся в клетках головного мозга при заражении вирусом бешенства, в головном мозге одной из видов летучей мыши, что позднее было подтверждено возможностью ими активного заражения людей при укусах.

Патогенный вирус выделяется со слюной животного и при укусе человека происходит передача вируса бешенства. Следует помнить, что заболевший человек не может быть опасным по отношению к окружающим его людям, то есть не является источником данного вируса. Таким образом, передача вируса бешенства происходит парентерально. Так как вирус присутствует в слюне больного животного, то во время укуса и формирования раны он проникает в неё и далее разносится по сосудистому руслу. Дикое или домашнее животное, заражённое вирусом бешенства, считается опасным в конце периода инкубации, то есть примерно за минимум 2, а максимум 10 дней до возникновения у него первых клинических симптомов.

Благодаря последним научным исследованиям, было установлено, что нельзя исключать и возможность заражения такими путями, как трансплантационный (в результате пересадки, к примеру, роговицы глаза от больного человека здоровому), аэрогенный (заключающийся в возможном распространении вируса по воздуху), и алиментарный, основывающийся на предположении о попадании в организм человека данного вида вируса через употребление заражённой пищи. Также в ходе анализа случаев укуса больными животными людей было установлено, что при локализации раны в области шеи и лица риск заражения вирусом бешенства составляет до 90%. Если же человек был укушен в ногу либо в руку, то вероятность того, что вирус проникнет в организм и станет оказывать на него своё повреждающее действие колеблется в пределах 20-23%.

Вирус бешенства у человека выявляется чаще всего при укусе диким животным, значительно реже это происходит по вине скота или домашних животных. Самым важным моментом считается незамедлительное обращение за медицинской помощью, с целью введения специфической вакцины по разработанной схеме для предотвращения развития бешенства у человека. Если будут проведены данные профилактические мероприятия в полной мере и, самое главное, своевременно, то вирус, вызывающий бешенство не окажет повреждающее действие на человеческий организм и будет элиминирован.

Сколько и как вирус бешенства живет в окружающей среде

Говоря о физических свойствах, следует отметить слабую устойчивость вируса бешенства в окружающей среде, также под воздействие различных дезинфицирующих средств он достаточно быстро подвергается разрушению. Плохая устойчивость вируса бешенства отмечается и по отношению к обычному хозяйственному мылу, медицинскому спирту, формалину, раствору аммония, раствору соляной кислоты, эфиру, раствору перманганата калия. При обработке и воздействии на возбудителя вируса бешенства фенола, йода, антибактериальных препаратов отмечается его большая устойчивость, но, однако, непродолжительная. При воздействии высоких температур нагревания он быстро погибает, а именно губительной считается для него температурное значение в 60°C и выше, когда он погибает за 10 минут. В процессе кипячения вирус погибает в течение всего лишь двух минут. Температура в 50°C позволяет сохраняться вирусу на протяжении полутора часов. Что касается воздействия низких температур, то их он переносит достаточно неплохо и сохраняет свои вирулентные свойства при минусовой температуре до 4 месяцев. Ультрафиолетовое излучение, а также прямые солнечные лучи убивают вирус бешенства очень быстро. Также под воздействием различных протеолитических ферментов он не может сохранять свою жизнеспособность, как и при воздействии щелочей и жирорастворяющих веществ. Однако в трупах заражённых животных отмечается возможность его выживания и сохранения продолжительностью до 3 и даже 4 месяцев, что свидетельствует о высокой устойчивости вируса к процессам разложения, а также гниения. Это свойство вируса представляет большую опасность для охотников, которые могут заразиться при контакте с трупом найденного животного.

Вирус бешенства очень хорошо способен культивироваться в культуре клеток куриного эмбриона, а также в фибробластах человека. Также используют метод его выращивания в результате заражения таких лабораторных животных, как крысы и мыши, путём введения его культуры в головной мозг. Диагностическим признаком удачного культивирования считается обнаружение в цитоплазме клеток особых включений, носящих название тельца Бабеша-Негри, которые относятся к эозинофильным и содержат в своём составе вирусный антиген.

Штаммы вируса бешенства

На протяжении всего времени существования возбудитель вируса бешенства подвергался всевозможным изменениям и мутациям, в результате чего установлено существование около 7 его генотипов. Первый генотип или генотип 1, а по-другому, классическое бешенство, распространён в Евразии, странах Америки, а также Африки. В этих же странах регистрируются случаи заражения также и 5 и 6 генотипами, однако они встречаются значительно реже. Главным образом распространение генотипов вируса бешенства происходило в результате процессов активной колонизации, а также исследования территорий. Но следует заметить, что существенного различия между этими всеми штаммами вируса не выявлено, поэтому они вполне могут быть использованы в лабораторной практике, а также в качестве получения вакцины для профилактики заражения не только людей, но также и животных во всём мире.

Принято различать также два общих вида вируса бешенства: так называемый дикий вирус, который переносится животными и опасен для человека, и фиксированный вирус бешенства, который для человеческого организма считается безопасным.

Вирус бешенства различается по серотипам, которые носят названия: непосредственно вирус бешенства, Дювенхейдж, Лагос, Мокола. Эти штаммы различаются между собой по такому показателю, как вирулентность, то есть по способности заражать организм человека при его заболевании: от высокой до низкой. Важным моментом еще является и вид, к которому относится заражённое животное, а также возраст заражаемого человека. К тому же существует разделение вируса бешенства по эпизоотическим проявлениям, к которым относят вирус бешенства, передаваемый такими наземными животными, как шакалы, волки, еноты, лисы и другие, а также, так называемые, эпизоотические проявления хироптерного происхождения, которые передаются различными видами летучих мышей.

Несмотря на наличие всевозможных штаммов вируса, типов и видов, общим и неизменным для них считаются основные этапы патогенеза. Первоначально вирус бешенства попадает вместе со слюной заражённого животного в рану на теле человека, далее он распространяется по организму, направляясь к аксонам нервных клеток спинного, головного мозга, где происходит его массивное размножение. По мере увеличения количества вируса бешенства в организме человека, он активно начинает мигрировать к ткани и органы. Также важной особенностью всех штаммов вируса является его возможность связывать ацетилхолиновые рецепторы, тем самым повышая способность клеток к повышенной рефлекторной возбудимости, что при высокой вирулентности может приводить к параличу.

При заражении вирусом бешенства его патологическое влияние направлено на все клетки, входящие в состав коры полушарий головного мозга, а также на ядра располагающихся там черепно-мозговых нервов. Персистирование вируса в нервных клетках неизбежно приводит к их перерождению, что приводит к различным функциональным расстройствам в работе всех иннервируемых ими органов и систем. Определение принадлежности вируса к тому или иному штамму требует достаточно сложных и дорогостоящих лабораторных исследований. Обычные серологические реакции не способны различать разновидности вируса бешенства.

Бешенство (лат. Rabies, Lyssa, Hydrophobia) известно давно как заболевание диких и домашних животных. Вирус бешенства избирательно поражает клетки центральной нервной системы, поэтому заболевание сопровождается возбуждением, судорогами, а затем наступают параличи.

Морфология и биологические свойства . Вирус бешенства имеет форму палочки размером 100—150 нм, покрыт оболочкой. В цитоплазме пораженных клеток образует включения, которые были описаны в 1892 г. Бабешом, а в 1903 г. — Негри. Их называют тельцами Бабеша— Негри. Форма включений сферическая, величин 1—20 мкм, по Романовскому окрашиваются в красны цвет. Обнаружение их в клетках аммонова рога имеет диагностическое значение.

Вирус культивируется в мозговой ткани мышиного эмбриона, при заражении в желточный мешок или мозг куриных эмбрионов, а также в организме кролика.

Различают два типа вируса бешенства : уличный вирус, который выделяют от больных людей и животных, и фиксированный вирус, полученный Пастером при длительных пассажах уличного вируса через мозг кролика (вирус фикс). Вирус фикс вызывает при заражении кроликов паралич через строго фиксированный, сокращенный инкубационный период в 3—7 дней. Он непатогенен для человека, собак и других животных, не выделяется со слюной животных и человека, редко обнаруживается в периферически нервах и не образует телец Бабеша — Негри. Фиксированный вирус, потерявший вирулентность для человека животного, используют при изготовлении антирабически вакцин. В механизме иммунитета, возникающего поел введения вакцин против бешенства, наибольшее значение имеет феномен интерференции вирусов. Сущность этого феномена заключается в способности одного вида вируса, внедрившегося в клетку хозяина, задерживать репродукцию другого вида вируса, попавшего в эту же клетку позже. Фиксированный вирус, имеющий большую тропность к нервной ткани, быстро размножается ней и препятствует развитию уличного вируса.

Устойчивость. Вирус бешенства малоустойчив в внешней среде: быстро погибает при нагревании, под действием солнечных лучей и дезинфицирующих веществ (формалин, фенол, сулема). В 50% глицерине может сохраняться при—20—40°С несколько лет.

Патогенность. К уличному вирусу бешенства восприимчивы все теплокровные дикие и домашние животные, в меньшей степени — птицы. У лабораторных животных (кролики, белые мыши, морские свинки) возникают паралитические формы бешенства при различных путях заражения.

Патогенез и клиника. В организм человека вирус бешенства проникает со слюной при укусах бешеных животных или ослюнении кожи человека больным животным. По стволам периферических нервов вирус достигает центральной нервной системы и поражает ее. Инкубационный период при бешенстве чаще длится от 1 до 3 мес и висит от локализации укуса. При укусах лица и шеи от период короче (от 10 дней до года) . Заболевание начинается с появления боли на месте укуса, чувства страха, беспокойства, раздражительности. При попытках налиться и даже при виде воды появляются судороги глотательных мышц, поэтому заболевание бешенством называют водобоязнью, или гидрофобией. Больной возбужден, сознание нарушено, наблюдаются судорожные припадки. Больные могут кусаться, бросаться на медицинский персонал. Через несколько дней возникают параличи мышц конечностей, лица, дыхательной мускулатуры и наступает смерть. Продолжительность заболевания 6— 7 дней.

Вирусологическая диагностика. Методы прижизненной индикации вируса бешенства не разработаны. Диагноз ставится на основании типичной клинической картины заболевания. После смерти в пораженных клетках мозга находят тельца Бабеша — Негри. Специфический антиген можно обнаружить также методом флюоресцирующих антител. Вирус можно выделить путем заражения лабораторных животных: кроликов, белых мышей и морских свинок, при вскрытии которых в клетках пораженного мозга обнаруживают включения Бабеша — Негри.

Профилактика и лечение. С целью специфической профилактики вводят антирабическую вакцину, впервые предложенную Пастером. Вакцины готовят из взвеси мозговой ткани кроликов, овец или сосунков белых крыс, зараженных фиксированным вирусом бешенства. Существуют различные типы вакцин, отличающиеся между собой количеством и качеством консервантов. Вакцина Ферми содержит 1% фенола, вакцина Семпля — 0,25% его, вакцина Филлипса — глицерин. В последние годы предложена живая антирабическая вакцина из вируса, который культивируется на эмбрионах птиц (вакцина Флери). Действие вакцины основано на явлении интерференции вирусов. Вакцинации подвергаются все люди, укушенные или ослюненные больными или подозрительными на бешенство животными. Противопоказаний к применению вакцины не имеется, так как это единственный способ спасения зараженных. Обычно прививки делают многократно в течение 12—30 дней и более в зависимости от тяжести укуса, его локализации, времени, прошедшего после укуса. Вакцину вводят подкожно в область живота.

Прививки необходимо начинать как можно раньше после укуса и проводить согласно существующей инструкции. Иммунитет, возникающий после прививки, сохраняется до 6 мес. Людям при появлении признаков заболевания прививки не делают. При тяжелых укусах в области головы, шеи одновременно с антирабической вакциной вводят гамма-глобулин или антирабическую сыворотку. За подозрительными животными ведут наблюдение в течение 7 дней и, если признаков заболевания не наблюдается, их считают здоровыми. Эффективные методы лечения бешенства отсутствуют.